抗独特型抗体白介素2ELISA检测试剂盒样本要求及判断的方法

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查看6815 | 回复0 | 2024-6-22 09:26:24 | 显示全部楼层 |阅读模式
  抗独特型抗体白介素2ELISA检测试剂盒样本要求
  1. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
  2. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存或根据存放,时间做相应温度调整,但应避免反复冻融,(由于样本种类过多,每个单位处理方式不一样,本说明书不做详细介绍)。
  白介素2ELISA检测试剂盒
  操作程序
  加样详细操作流程请联系客服索要说明书)
  配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释备用。
  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟。2. 倒出多聚赖氨酸溶液,用5ml PBS冲洗一次后,可立即使用,或存数周内使用。
  终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后10分钟以内进行。需要用eagles液一种为含枸椽酸和重碳酸氢钠的药片血液要全血时
  结果判断
  1. 每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。(若不减零孔值,标准曲线的零孔应相交于Y轴)
  2. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种熟悉应用软件来计算。
  3. 手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。推荐使用专业制作曲线软件进行分析计算结果。冷冻管有可能因此而造成细胞污染为避免固醇类反应
  4. 白介素2ELISA检测试剂盒标本OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察,发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形,在还未漂起时,弃去消化液,加入培养液终止消化。

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